某市奶牛结核病和布鲁氏菌病普查与防治措施

        结核病、布病均属于人畜共患慢性传染病，分别是由结核分枝杆菌和布鲁氏杆菌引起的，主要症状为干咳、易疲劳、贫血、体表淋巴结肿大、顽固下痢、消瘦、流产、空胎、关节炎等，可引起肉、奶等畜产品质量、产量下降，使奶牛免疫力、繁殖力降低，从而严重影响养牛业发展。此外，这两种病还会交叉感染人，危害人体健康，给国家、集体和人民群众带来巨大损失。本文对某市奶牛结核病和布鲁氏菌病进行了调查，并提出了防治措施，以供参考。
        1 材料与方法
　　1.1 牛结核病的材料
　　牛型提纯结核菌素。
　　1.2 牛布鲁氏菌病的材料
　　家畜布鲁氏菌病虎红平板凝集抗原，家畜布鲁氏菌病试管凝集抗原，布鲁氏菌病阳性血清，布鲁氏菌病阴性血清，0.5%苯酚生理盐水。
　　1.3 家畜布鲁氏菌病血清样品
　　对某市所有被检奶牛尾根静脉进行采血并编号，常规分离后的血清，即为样品。
　　1.4 设备、仪器
　　DK-600型电热恒温水槽，试管和试管架若干，卡尺，5ml一次性注射器，酒精棉球，工作服，口罩，记录表等。
　　1.5 结核病的检验步骤
　　稀释结核菌素：用10ml灭菌生理盐水将冻干牛型提纯结核菌素稀释为10IU/ml。于侧中上1/3处剪毛，直径约10cm，用游标卡尺测量术部中央皮皱厚度。然后用75%酒精棉球消毒术部，用2.5ml的皮内注射器吸取稀释好的结核菌素，每只牛皮内注射0.2ml。72h后观测并记录术部皮皱厚度，对两次的皮皱厚度进行比较，进行结果判定。对结果判定为可疑的牛，在术部对侧进行第二次检疫，72h后观测并进行结果判定。
　　1.6 布鲁氏菌病的检疫步骤
　　1.6.1 虎红平板凝集试验
　　先取布鲁氏菌虎红平板凝集抗原0.03ml于凝集板，再取被检血清0.03ml与其混匀，在室温下（20℃）经4～10min，记录反应结果。同时，取阴性和阳性布鲁氏菌病血清与抗原混匀，（m.mfservicos.com）做对照。
　　1.6.2 标准试管凝集试验
　　抗原稀释：取抗原与0.5%的石炭酸生理盐水按1∶20的浓度稀释，长霉或出现凝集块的抗原不能应用。被检血清稀释度：奶牛布鲁氏菌病的实验室检疫一般采用1∶25、1∶50、1：100、1∶200这4个稀释度，当然，在大规模检疫时，只用2个稀释度，即用1∶50、1∶100，根据程序依次操作。阴性血清对照：操作步骤与被检血清相同。比浊管对照：每次试验须制备比浊管，以作为结果的依据，配制方法即以当时使用的已稀释抗原（1∶20）加等量稀释液，稀释为1∶40的抗原，全部试管充分振荡后，置37～38℃温箱中22～24h，取出并用比浊管对照检查记录结果。
　　2 结果
　　2.1 结核病判定标准
　　阳性反应：局部有明显的炎性反应，皮厚差大于4mm，记录为阳性（+）；可疑反应：局部炎性反应不明显，皮厚差在2.0～4.0mm，记录为可疑（±）；阴性反应：无炎性反应，皮厚差在2.0mm以下，记录为阴性（-）。被判定为可疑的牛，经复检后72h，观测结果仍为可疑的判为阳性。
　　2.2 布鲁氏菌病判定标准
　　虎红平板凝集试验：在阳性血清及阴性血清试验结果正确的对照下，被检血清出现任何程度的凝集现象均判为阳性，完全不产生凝集现象的判为阴性，无可疑反应。试管凝集试验：牛血清凝集价在1∶100以上为阳性，1∶50为可疑。
　　2.3 检疫结果
　　据以上方法，我们对江阴市万余头奶牛进行了“两病”的检疫，结果为：布病阳性0头，阳性率为0.00%；结核病共检出阳性牛8头，阳性率为0.08%。
　　3 小结与讨论
　　我们对江阴市各大奶牛场进行“两病”检疫，结核病受检头数共9653头，检出阳性牛8头，布病共检测4672头，检出阳性0头。
　　（1）根据历年的数据可以看出，如东县每年养奶牛的头数不断增加，但总的发病率没有随着奶牛的增多而增加，整体状况比较好，布病阳性率一直为0，但仍有个别牛场有结核阳性牛。
　　（2）对于出现的个别结核阳性牛有以下原因。对于散户来说，由于管理的不严格，而且奶牛来源比较复杂，较容易发病。在结核菌素的选择方面，牛型结核菌素（PPD）与老结核菌素和合成结核菌素相比，还必须注意结核菌素是否过期、是否按要求保存和运输、瓶盖有无松动、提纯冻干菌素是否出现潮解和干缩、溶解后有无异物等，此外，结核菌素开瓶使用后，必须当日用完。虽然提纯结核菌素使用说明书规定了判定标准，但在实际工作中有些牛的反应不明显，导致难以判定，这就要求检疫人员不能简单的依照说明书进行，而要全面、综合的进行分析和判定。主要根据其局部炎性反应程度来判定，而且要考虑到多测的皮厚有一个误差值。被检出反应的牛，不一定在剖解时能见到病变或分离出结核菌。而另一方面，在结核污染较严重的牛群中，有些老龄病牛体质瘦弱时亦呈阴性反应。
　　参考文献
　　[1]蔡宝祥.实用家畜传染病学[M].上海：上海科技出版社，1989.
　　[2]李佑民.家畜传染病学[M].北京：蓝天出版社，1993.
　　[3]蔡宝祥.家畜传染病学（第四版）[M].北京：中国农业出版社，2001：76-77.